LipoD293™体外DNA转染试剂(升级版)

价格: ¥1,760.00

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产品介绍:
利用我们的创新和专有的脂质体共轭结合技术,专门设计和配制了
LipoD293™ (Ver. II)转染试剂,它添加了专有的增强剂促进HEK293细胞和其它的哺乳动物细胞的转染。作为DNA转染试剂的第二代脂质体产品,对HEK293相关细胞和其它哺乳动物细胞, LipoD293™ (Ver. II)转染试剂提供了极高的转染效率,并且细胞毒性 低。LipoD293™ (Ver. II)转染试剂,通过加入转染增强肽的方式,使基因转 染效率提高了34倍。LipoD293™(Ver. II)转染试剂,1.0ml,能在24孔板中足够完成666次转染,在6孔板中足够完成333次转染。


图 1. 示意图说明LipoD293™转染试剂(升级版)增强转染的原理。

产品特点:
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难转染细胞的最佳选择
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产生高滴度的病毒
- 对长DNA片段同样有效(最长可达180kb)
- 对悬浮293细胞同样有效(例如293F, 293H等)
- 产生高 水平的重组蛋白
- 血清和抗体不影响转染效率
- 对单DNA和多DNA片段的共转染特别有效
- 物美价廉

储存条件:
40
C储存。若储藏合适,产品的稳定性能保持12个月以上。

LipoD293™体外DNA转染试剂(升级版)与市场主导品牌产品转染效率的比较。

LipoD293™试剂(升级版)lipofectamine 2000 (L2K)Fugene HD对HepG2细胞转染效率的比较。右图:使用以上转染试剂将GFP的cDNA (pEGFP-N3)按照生产商的提供的转染步骤转染到HepG2细胞 (在胶原预处理的培养皿中培养)。在转染48小时之后,用流式细胞仪检测GFP阳性细胞(%)和荧光强度。左图:血清和抗生素存在的条件下能提高LipoD293试剂(升级版)HepG2细胞的转染效率。通过三种不同的条件下转染HepG2细胞(生长在胶原处理的培养皿上) ---无血清和抗生素,10%血清和抗生素的存在,转染5小时后换液和不换液。


LipoD293™试剂(升级版)Lipofectamine 2000 (L2K), TransITFugene 6对CHO细胞转染效率的比较。右图:使用以上转染试剂将编码荧光素酶蛋白的cDNA (phRL-CMV)和绿色荧光蛋白GFP的cDNA按照生产商的提供的转染步骤分别转染到CHO细胞在转染24小时后,荧光素酶的活性使用Beckman公司的化学发光监测器测定;GFP阳性细胞率使用BD公司的FACS检测。左图:LipoD293试剂(升级版)Lipofecatmine 2000 (L2K), TransIT以及Fugene 6的价格比较(美元/1000微升)。所有的价格是从生产制造商的网站上收集的。


LipoD293™试剂(升级版)Lipofectamine 2000 (L2K)对在难转染细胞(原代大鼠动脉平滑肌细胞)的转染效率的比较。制备大鼠的动脉平滑肌原代细胞并用使用LipoD293™试剂(左图)Lipofecatmine 2000(L2K,右图)分别将GFPcDNA(pEGFP-N3)按照生产制造商的转染操作步转染至该细胞。转染24小时后,用尼康Eclipse 2000 荧光显微镜检测GFP荧光,以此来评价转染效率。上面的图片由芝加哥大学的肺和重症护理系的Nickolai Dulin博士友情提供的。


LipoD293™试剂和Fugene HD对难转染细胞LNCap细胞转染效率的比较。LNCap细胞的培养和传代严格由ATCC建议的操作步骤进行,与pBabe-hygro-SSeCKs (1.5ug)pEGFP-N3 (1:1,共1.0 微克)共转染(6孔板中每孔的量),并用 LipoD293™试剂(左图)Fugene HD (右图)分别按照生产制造商的科学实验步骤进行转染。转染24小时后,用尼康Eclipse 2000 荧光显微镜检测GFP荧光,以此来评价转染效率。上面的图片由罗斯威尔公园癌症研究所(Roswell Cancer Institute)Lyn Gao博士友情提供的。


LipoD293™试剂对难转染细胞像HepG2和SaoS-2上出色的转染效率。在血清和抗生素的存在下,HepG2和SaoS-2细胞用pEGFP-N3和pSV-β-半乳糖苷酶DNAs分别转染达到95%的细胞融合。转染48小时后,分别通过Zeiss 510激光共聚焦显微镜和 β-半乳糖苷酶染色试剂盒检测效率。



LipoD293™试剂和 293fectin对HEK293细胞转染效率的比较。LipoD293™体外DNA转染试剂(Ver. II)(上图)和受欢迎的品牌产品Invitrogen公司的293fectin™(下图)转染pEGFP-C1质粒到HEK293细胞中。转染24小时后,细胞的尼康Eclipse荧光显微镜DIC成像图(左侧)和荧光成像图(右侧)

LipoD203_vs_293fectin_HEK293_II

LipoD293™试剂和 293fectin,XfectFugene 6转染试剂对悬浮HEK293F产生蛋白质效率的比较30毫升的293F细胞分别使用LipoD293™试剂、293fectin、XfectFugene 6等转染试剂按照生产商的标准转染步骤将pEGFP-6xHis质粒导入细胞表达,用量为LipoD293™试剂,20微克,所有其他三种转染试剂均使用30微克质粒DNA。转染48小时后,使用尼康荧光显微镜GFP荧光进行成像(左侧四幅图),A:LipoD293; B:293fectin;C:Xfect和D:Fugene 6.  带有6xHis标记的 GFP荧光蛋白使用Ni-NTA亲和柱技术实现分离。5微升洗脱液载入SDS-PAGE凝胶电泳分离并进行Coomassie亮蓝染色(右上图E),道1为LipoD293293、道2为标准蛋白分子、道3为Xfect、4为293fectin和5为Fugene 6。这四种转染试剂产生蛋白质的效率被进一步定量(见右下图F)。



LipoD293™试剂(升级版)Lipofecatmine LTX (LTX)产生慢病毒的比较。通过LipoD293™试剂(升级版)Lipofectamine LTX (LTX)试剂将三个cDNAs共转染进293T细胞。一个GFP载体,pHR-SIN-cppt-CMVEWP被用来测定慢病毒的滴度。在24孔板中每孔加入1x10^5 293T细胞,其次是分别添加不同量的慢定都上清液,1 微升(上图)10微升(下图)5天后,细胞通过流式细胞仪检测。右上角的数字表明转导的细胞的百分比来测定慢病毒的滴度。由LipoD293™ and LTX产生的慢病毒的滴度被量化,分为是8x10^63x10^6tu/ml


转染试剂操作步骤及其使用指南
- LipoD293™试剂(升级版)哺乳动物细胞转染操作步骤

- LipoD293™试剂(升级版)转染操作步骤简化版
- LipoD293™试剂(升级版)悬浮293CHO细胞生产重组蛋白质转染操作步骤

- LipoD293™试剂(升级版)生产慢病毒的转染操作步骤
- LipoD293™试剂(升级版)生产重组腺相关病毒转染操作步骤


LipoD293体外DNA转染试剂感兴趣?网上注册即可收到一份免费试用样品。上网注册请点击账户注册,输入您的邮寄地址后,请发送邮件至info@signagen-china.com




用户评价:
I am absolutely thrilled with the LipoD293 transfection reagent! I compared LipoD293 to Lipofectamine for transfection of plasmids to generate viral pseudoparticles and WOW! I recovered 4 times more virus using the LipoD293 reagent than Lipofectamine!! This is wonderful news for me and my mentor as it means that I don't have to spend so much time (and resources) on transfecting 293T cells to recover virus for in vitro experiments. My mentor was also very happy that LipoD293 costs much less than Lipofectamine!! We have already ordered 5 mls of LipoD293 and I have now convinced my lab mates to switch to LipoD293 since I got such good results with it. Thanks for making such a great product!
-------- Christy Lavine, Ph.D., Harvard University

I wanted to update you on the free sample of LipoD293 that you sent to us. I recently transfected some Plat-E's side-by-side with Lipofectamine 2000, and your product out-performed it!!! We are also validating it with HeLa cells, but otherwise we are VERY happy with what we have seen thus far! Thank you for sending us the free sample, it definately made the SALE for us!
--------Catherine Gallo, Ph.D., University of Cincinnati

we have now tried the LipoD293 DNA In Vitro transfection reagent on 293FT cells. In the first flask we used the protocol by Invitrogen provided in theVirapower box insert (Virapower, pBABE-GFP plasmid, plus Lipofectamine). In the second flask we used LipoD293 (30 ul/6ml media) with the same amounts of Virapower and plasmid as in the first flask. The results were stunning:LipoD293 gave twice as many transformants as Lipofectamine 2000...
-------- A Beta Tester from Wayne State University



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