PepMute™ Plus体外siRNA转染试剂

价格: ¥3,680.00

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  • 目录号: SL100571
  • 包装: 1.0 mL

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产品介绍:
PepMute™ Plus体外siRNA和DNA转染试剂是PepMute™转染试剂(目录号:SL100566)的升级版。
PepMute™ Plus体外siRNA和DNA转染试剂是在PepMute™转染试剂的基础上经过其骨架添加输水性氨基酸所得到的。基于我们独特的pH依赖的分子构象转化技术,我们在36个氨基酸组成的骨架多肽基础上经过添加输水性的氨基酸并经过反复筛选得到,这种化学修饰赋予PepMute™ Plus试剂一种独特性质,即在形成转染复合物时该试剂获得了自我装配的特性。这一特性使得该试剂成为一个最为高效的转染试剂,实验证明,该试剂对siRNA有及其高效的转染效率,即使在siRNA终浓度为1.0 nM时,也可以获得95%基因沉默效率。 PepMute™ Plus试剂已经被证明可有效地对多种哺乳动物细胞进行有效的siRNA和DNA转染以及和DNA/siRNA共转染。


1: 示意图说明PepMute™ Plus转染试剂的化学特性以及工作原理。

产品规格:
1.PepMute™ Plus转染试剂,1.0ml,在24孔板中转染2.5pmols siRNA能达到1000个反应。
2.PepMute™ Plus转染缓冲液(5X),按转染效率最大化配制,8.0 mL(5X )能制成40 ml工作液.

储存条件
4℃储存。若正确储存,产品的稳定性能保持12个月以上。

产品优势:
1.只有0.5 pmol siRNA(1.0 nM siRNA 在24孔板中)达到95%的有效敲除。
2.适用于难转染细胞
3.单管反应转染,步骤简单
4.适用于广泛的范围特别是难转染的哺乳动物细胞
5.细胞毒性低


PepMute™ Plus siRNA & DNA转染试剂和品牌产品的击倒效应的比较

图2: PepMute™ Plus转染试剂(上图)和 Dharmafect™ 4 siRNA转染试剂(中图)和Lipofectamine™ 2000 (下图)在 HEK293细胞上击倒效率的对比。siRNA抑制的海肾荧光素酶在不同的最终浓度范围(0.5~20nM)与海肾荧光素酶基因(0.5 µg pRL-CMV DNA/孔,24孔板)通过上述的三种转染试剂按照生产制造商的科学实验步骤共转染入 HEK293细胞。共转染24小时后,通过海肾荧光酶测定系统(Promega)检测海肾荧光酶的活性。通过5 µl 裂解液10s的裂解整合,运用光度计(贝克曼库尔特LD 400)测量荧光。荧光酶活性的表达检测通过超过10s相对光单位(RLU)检测和采用BCA检测标准化的每毫克细胞蛋白含量。误差来自于重复的三次实验的标准偏差。计算未处理的细胞荧光素酶沉默效应。然而PepMute™ Plus和 Dharmafect™ 4试剂1.0nM海肾荧光素酶能产生显著地基因沉默效应,然而 lipofectamine™ 2000只有在浓度大于30 nM的时候产生效应。 (数据没有显示)


图3: PepMute™ Plus转染试剂击倒在HepG2细胞中的GFP基因表达.通过 PepMute™ Plus转染试剂将GFP cDNA, pEGFP-N3, 和siRNA抑制的GFP基因(终浓度是5.0 nM,右图)和假的siRNA (终浓度5.0 nM,左图)共转染入HepG2细胞。转染24小时后,用尼康 T2000荧光显微镜观察GFP荧光。定量分析表明,通过PepMute™ Plus转染试剂将5.0nM的GFP siRNA共转染入 HepG2细胞能达到96%的GFP表达沉默效应。



转染操作步骤 
- A Protocol for DNA/siRNA Co-Tranafection to Mammalian Cells
- A Protocol for siRNA Transfection to Mammalian Cells
- A Protocol for DNA Transfection to Mammalian Cells




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